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- 概览
- 宫颈癌简介
- 基因组介绍
- 致癌机理
- 检测靶点
人乳头瘤病毒
人乳头瘤病毒（Human papillomavirus, HPV）是导致宫颈癌的主要致病元凶，宫颈癌的发病过程与HPV基因组的整合有着密切的关系。HPV基因组分为3个部分：早期基因区（E）、晚期基因区（L）及长调控区（LCR）。早期基因区（E）的E6、E7是致癌基因，编码的致癌蛋白是导致宫颈上皮癌变的重要因子，这两种蛋白与细胞内两种主要抑癌蛋白p53和pRb的结合以及调控可以明显改变细胞生长周期和DNA修复，由此导致基因组的不稳定性是细胞转化和永生化的必要条件。
宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤，其死亡率仅次于乳腺癌。近年来，宫颈癌的发展趋势逐渐偏向年轻化且呈逐年上升现象。宫颈癌虽然是恶性肿瘤，但其历程漫长，从癌前病变发展到恶性的浸润性宫颈癌需要5-10年的时间。人乳头瘤病毒( HPV) 感染是宫颈癌的主要致病元凶，研究表明99.7% 的宫颈癌患者存在HPV感染 [1]。HPV感染与宫颈癌有高度相关性， HPV阴性者几乎不会发生宫颈癌。因此，宫颈癌筛查至关重要。宫颈癌筛查项目中，临床上以HPV检测和TCT检查较为常见。
HPV是一种双链的小DNA病毒，具有7900个碱基对，由病毒蛋白外壳和核心DNA物质构成，无包膜。病毒基因组分为3个部分：早期基因区（E）、晚期基因区（L）及将早期区与晚期区分开的长调控区（LCR）。调控区主要调控病毒的转录，控制病毒蛋白和感染颗粒的产生。早期区编码E6、E7、E1、E2、E4和E5蛋白质，主要参与病毒DNA的复制、转录。晚期区编码L1、L2蛋白质，分别是病毒的主要和次要衣壳蛋白 [2]。
E6/E7是致癌基因，编码病毒癌蛋白，在细胞转化和维持转化组织恶性表型的过程中起着至关重要的作用。宫颈病变直至浸润癌的发展过程与HPV基因组整合至宿主细胞基因组密切相关，伴随着E2基因的丢失和随后E6/E7致癌基因的过度表达。E6/E7基因编码的致癌蛋白是导致宫颈上皮癌变的重要因子，这两种蛋白与细胞内两种主要抑癌蛋白p53和pRb的结合以及调控可以明显改变细胞生长周期和DNA修复，由此导致基因组的不稳定性是细胞转化和永生化的必要条件，见图1 [3]。
HPV导致宫颈病变的过程图示：
从低级别病变发展为癌的过程中，HPV基因组会发生整合。在整合过程中，E6/E7基因持续存在，L1基因可能会丢失。但由于L1基因相对保守，更适合于以通用引物为靶点的检测 [4]，由于受限于现有的技术平台，几乎所有的HPV检测产品均以L1为检测靶点。在宫颈高级别病变中，由于基因组的整合会使L1基因有丢失的可能，因此，以L1基因作检测靶点会对HPV有漏检的可能。相反，如果检测靶点设计在E6/E7基因，不管HPV基因组是否发生整合，都可以检测出HPV阳性的病人 [5]。
对56个浸润性宫颈癌组织活检样本分别用L1区通用引物和E6/E7分型引物进行检测比较发现，有23个样本存在L1区缺失 [5]。研究发现，HPV 18的L1/E1区更容易丢失。几乎所有的HPV18阳性的宫颈癌中病毒基因组整合到人基因组上；而HPV16阳性的宫颈癌中也有≤60%的病毒基因组发生整合 [6]。一项基于15,774例病人样本的研究发现，跟型别特异性E6/E7引物PCR比较，通用引物MY09/11 PCR检测会造成10.9%（522例）的漏检；409例由MY09/11 PCR检测结果为阴性的病人中，随访发现最终有104人（25.4%）发展为CIN2+ [7]。
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