搜尋結果
完全消除质粒的细菌与质粒存在的原始菌株比较 ,可以 观察研究质粒的遗传学功能 ,完全消除质粒的细菌还可以作 为基因工程菌 ,广泛应用于分子生物学研究 。 1 材料与方法 111 菌株 以常规方法 从 正 常 人 肛 拭 子 标 本 分 离 得 到 的 大 肠 埃 希 菌 ,确定质粒 DNA上具有 Ⅰ类整合子 ,质控菌株 V517。 112 试剂 2 结果 211 质粒消除效果 30株试验大肠杆菌用 0105% SDS1 消除质粒 ,琼脂糖凝 胶电泳未检测到质粒 ,质粒 DNA PCR 扩增未检测到 Ⅰ类整合 子的有 8株 ,消除率为 27% ;琼脂糖凝胶电泳检测质粒谱型改 变 ,质粒 DNA PCR扩增检测到 Ⅰ类整合子的有 12株 ;质粒谱 型没有改变有 10株 。
摘 要 ：利 用化 学消 除剂 或 改变 生长 条件 可 以消 除 细菌 中 的 质粒 。除 宿 主菌 的 特性 及 其 所 含 质 粒分 子 量大 小之外 ， 消除 率还 与消 除剂 浓度 、作 用 时 间有 关 。嵌 合 染料 适 用 于 消 除大 肠 杆 菌 中的质 粒 。
质粒消除剂是指通过抑制质粒的拷贝或复制使子代细菌中的质粒消失 ， 并使其介导的耐药性也 摘 要 ： 随之丧失的一些物质 。 自从质粒消除剂概念提出以来 ， 对此研究越来越深入 ， 并取得了一定的进展 。 论文就 大肠埃希菌耐药质粒特征 、 耐药质粒消除方法及其作用机制的研究进展进行了综述 ， 旨在探讨一种有效逆转 耐药性的方法 。 大肠埃希菌 ； 耐药质粒 ； 质粒消除 关键词 ： 中图分类号 ： S 8 5 2． 6 1 2 文献标识码 ： A 文章编号 ： （ ） 1 0 0 7 5 0 3 8 2 0 0 9 0 1 0 0 8 9 0 4.
自杀质粒法构建基因缺失株-LOGO一、自杀质粒方法原理简介上下游同源臂sacB 接合catLOGO二、重组质粒的构建同源臂扩增重组 质粒DNA片段和载体的 酶切与连接LOGO1.同源臂扩增•NCBI上 BLAST要敲 除的基因 •出现很多 菌株的同 源序列•截取待敲 除基因两 侧的基因 ...
对 质粒进行遗传学研究时 ，常希望得到其消除 质粒的衍生菌株 ，这样可以 方便比 较 观察 质粒的遗传功能 ，同时完全消除 质粒的菌株还可以 用于基因工程菌 ，这在分子生物学 研究领域被广泛应用。 某些质粒可自发的从细胞中丢失，但大多数质粒在细胞内很稳定，且 自 然丢失的 概率很低 ，仅为10-2～10-8。 要想获得 消除 质粒的 菌株 ，需要使 用合适的 物理或 化学方法干扰质粒复制、或降低质粒的稳定性，人为地提高质粒丢失的频率，以达到质粒消 除的目的。 [0003] 目前质粒消除的方法有物理法、化学处理法和分子生物学法。
质粒构建是分子生物学、基因工程的重要步骤，构建方法分为三大类：经典方法、无限制性酶切的PCR方法、同源重组方法.经典方法通过限制性酶切割DNA-载体产生匹配的黏性末端，再由DNA连接酶连接.PCR方法通过扩增具有同源端部的DNA ...
以下是 PKD46 质粒消除的一般步骤： 1.选择适当的消除方法：根据质粒的性质和宿主细胞的特点，选 择最合适的消除方法。 常用的方法包括抗生素消除、温度敏感消除和 利用宿主细胞内源性酶进行消除。 2.准备所需试剂：根据所选的消除方法，准备所有必要的试剂。 这可能包括抗生素、特异性酶、培养基和其他所需的化学试剂。 确保 所有试剂的质量和纯度符合实验要求。 3.建立实验操作流程：设计详细的实验操作流程，包括质粒消除 的具体步骤、所需时间、温度控制以及任何需要注意的操作细节。 流 程应清晰、简洁，并确保消除过程的可重复性。 通过以上步骤，可以有效地消除 PKD46 质粒，确保实验结果的准 确性和可靠性。 在整个过程中，保持高度的专业性和严谨性是至关重 要的。
